1 材料與方法 

1.1 材料與試劑 

秘魯魷魚皮 北京市北水嘉倫水產(chǎn)品市場(chǎng)有限責(zé)任 公司。 氫氧化鈉、正丁醇、冰乙酸、氯化鈉、四甲基乙 二胺、過硫酸銨、考馬斯亮藍(lán)R-250（均為分析純） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；30 g/100 mL聚丙烯酰 胺儲(chǔ)備液、1.0 mol/L Tris-HCl（pH 6.8）、1.5 mol/L Tris-HCl（pH 8.8）、10 g/100 mL十二烷基硫酸鈉 （sodium dodecyl sulfate，SDS）溶液、5×Tris-甘氨酸 電泳緩沖液（含0.125 mol/L Tris、1.25 mol/L甘氨酸、 0.5 g/100 mL SDS）、5×SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 （SDS-polyacrylamide gel electropheresis，SDS-PAGE） 蛋白上樣緩沖液（含10 g/100 mL SDS、0.25 mol/L Tris-HCl（pH 6.8）、體積分?jǐn)?shù)50%甘油、0.5 g/100 mL溴 酚藍(lán)、5 g/100 mL β-巰基乙醇） 北京蘭杰柯科技有限 公司；蛋白Marker（11～245 kDa） 北京索萊寶科技 有限公司。 

1.2 儀器與設(shè)備 

DZF-6050真空干燥箱 北京萊凱博儀器設(shè)備有 限公司；Milli-Q超純水系統(tǒng) 默克密理博實(shí)驗(yàn)室設(shè)備 （上海）有限公司；Sorvall LYNX-6000離心機(jī) 美國(guó) 賽默飛世爾科技公司；UV-2800紫外-可見分光光度計(jì) 美國(guó)尤尼柯公司；DYCZ-24KS凝膠電泳槽 北京六一 生物科技有限公司；PowerPac Universal電泳儀電源、 Gel Doc XR＋凝膠成像儀（配Image Lab Software） 美國(guó)Bio-Rad公司；TS-200搖床 海門市其林貝爾儀器制造有限公司；XploRA Plus拉曼光譜儀 日本 Horiba公司；Q200差示掃描量熱（differential scanning calorimetry，DSC）儀 美國(guó)TA公司。

1.3 方法

水分含量測(cè)定：參照GB 5009.3—2016《食品安全國(guó) 家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測(cè)定》；蛋白質(zhì)含量測(cè)定：參照 GB 5009.5—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定；脂肪含量測(cè)定：參照GB 5009.6—2016《食品 安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》；灰分含量測(cè)定： 參照GB 5009.4—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分 的測(cè)定》。參考Matmaroh等的方法，取適量秘魯魷魚皮用超 純水沖洗干凈，在4 ℃條件下，以液料比20 mL/g加入 0.1 mol/L NaOH溶液浸泡20 h，以除去秘魯魷魚皮中的非 膠原蛋白；然后用超純水沖洗秘魯魷魚皮至pH值中性， 瀝干后，以液料比10 mL/g加入10 g/100 mL正丁醇溶液， 攪拌浸泡20 h，以除去秘魯魷魚皮中的脂肪，然后用超純 水沖洗魷魚皮至中性，瀝干，備用。

2 結(jié)果與分析

秘魯魷魚皮中含有大量水分，其次是蛋 白質(zhì)，約占干物質(zhì)的90%，這與魏薇薇等的闡述一致。 通過GB/T 9695.23—2008《肉與肉制品 羥脯氨酸含量測(cè) 定》測(cè)得秘魯魷魚皮中羥脯氨酸的含量為1.17%，膠原蛋 白含量為12.99%，占蛋白質(zhì)總量的70.75%，可見秘魯魷 魚皮中膠原蛋白含量較高，是一種提取水產(chǎn)膠原蛋白的 優(yōu)質(zhì)原料。隨著液料比的增加，ASC提取率逐漸 上升。液料比10～20 mL/g時(shí)，ASC提取率增加明顯；液 料比高于20 mL/g時(shí)，ASC提取率增加緩慢，提取率為 25.40%～26.14%。因此，選擇液料比為15、20、25 mL/g 進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)。

3 結(jié) 論 

以秘魯魷魚加工副產(chǎn)物魷魚皮為原料，以ASC提取 率為指標(biāo)，對(duì)冰醋酸濃度、液料比和浸泡時(shí)間進(jìn)行單因 素試驗(yàn)和響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化，得到秘魯魷魚皮ASC最佳提 取工藝。通過紫外全波長(zhǎng)掃描、SDS-PAGE、拉曼光譜 及DSC測(cè)定提取的ASC特性，發(fā)現(xiàn)采用最佳工藝提取的 ASC屬于典型的Ⅰ型膠原蛋白，含有α1、α2和β鏈，且 蛋白結(jié)構(gòu)完整，三螺旋結(jié)構(gòu)未被破壞，其熱變性溫度為 50.07 ℃。本研究可為制備水產(chǎn)膠原蛋白包裝材料提供理 論依據(jù)，并為秘魯魷魚皮進(jìn)一步加工利用提供參考，進(jìn) 而提高秘魯魷魚副產(chǎn)物價(jià)值，減少資源浪費(fèi)。

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